制備干細(xì)胞及冷凍干燥

制備干細(xì)胞因子凍干粉，將35ml干細(xì)胞富因子溶液置于50ml離心管中，離心，1000g的離心力離心10min，以去除細(xì)胞碎片及其他大顆粒雜質(zhì)；所述干細(xì)胞富因子溶液，來源于間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)上清液，即間充質(zhì)干細(xì)胞生長匯合度達(dá)到95％時(shí)收集其培養(yǎng)上清液；向上述離心后得到的溶液中按照4g/100ml的濃度加入葡聚糖凝膠，浸泡6h，此時(shí)無機(jī)鹽分子會進(jìn)入凝膠網(wǎng)孔，細(xì)胞因子等蛋白質(zhì)及多肽則由于分子量過大被排阻在凝膠網(wǎng)孔之外；然后用80目篩網(wǎng)過濾去除吸附無機(jī)鹽溶液溶脹后的凝膠，得干細(xì)胞因子濃縮液，分裝至西林瓶，每支2～5ml，放入冷凍干燥機(jī)冷凍干燥，得到凍干粉，壓蓋 密封，于-20℃保存。凍干配方-細(xì)胞保護(hù)劑滲透性細(xì)胞冷凍保護(hù)劑：可以滲透到細(xì)胞內(nèi)，一般是一些小分子物質(zhì)，主要包括甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等。選用Pilot5-8EP冷凍干燥機(jī)適合干細(xì)胞的凍干，此款冷凍干燥機(jī)特點(diǎn)：凍干全程PAT技術(shù)：過程控制全自動化，過程分析準(zhǔn)確。適用范圍：制藥、醫(yī)療、生物基因工程高一致性、高表達(dá)凍干制品。價(jià)格：低于國外*價(jià)格。選擇理由：可靠性高、高標(biāo)準(zhǔn)凍干機(jī)中高性價(jià)比設(shè)備。